無菌室建造規程（chéng）及相關技術說明

一、目的
本規程旨在為無菌操（cāo）作及無菌室的保護（hù）提供一個標準化規程（chéng）。
二、適用（yòng）範圍（wéi）
微生物檢測實驗室
三、責任者 QC主管生測員（yuán）
四、安全（quán）注意事項
嚴格無菌操作，防（fáng）止微生物汙染；操作人員進入無菌室應先關（guān）掉紫（zǐ）外（wài）燈。
五、建造規程
1、無菌室應設有無菌操作間和緩（huǎn）衝間，無菌操作間潔淨度應達到10000級，室內溫（wēn）度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%。超淨台潔淨度應（yīng）達到100級。
2、無菌室應保持清潔，嚴（yán）禁堆放雜物，以防汙染。
3、嚴防一切滅菌器（qì）材和培養基汙染，已汙染者應停（tíng）止使用。
4、無菌室應備有（yǒu）工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等。
5、無菌室應定期用適宜的（de）消毒液滅菌（jun1）清潔，以（yǐ）保（bǎo）證無菌室的潔淨（jìng）度（dù）符合要求。
6、需要帶入無菌室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應包紮嚴密，並應經過適宜的方法滅菌。
7、工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然（rán）後在緩衝間（jiān）更換工作服，鞋（xié），帽子，口罩和手套(或用70%的（de）乙醇再次擦拭雙手)，方可進入無菌室進行操作。
8、無（wú）菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鍾（zhōng）以上，並且同時打開超淨台進行吹（chuī）風。操（cāo）作完畢（bì），應及時清理無菌室，再用紫外燈輻照（zhào）滅菌20分鍾。
9、供試品在檢（jiǎn）查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防汙染。檢查（chá）前，用70％的酒精棉球消毒外表麵（miàn）。
10、每（měi）次（cì）操作過程中，均應做陰性（xìng）對照，以檢查無（wú）菌操作的可靠（kào）性。
11、吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直（zhí）接用口接觸吸管。
12、接種針每次使用前後，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻後，方可接種培養物。
13、帶（dài）有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24小時後（hòu）取出衝洗。
14、如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石（shí）碳酸溶液或3％的來（lái）蘇爾傾覆在被汙染處至少30分鍾，再做處理（lǐ）。工作衣帽（mào）等受到菌液汙染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌後洗滌。
15、凡帶有活菌（jun1）的（de）物品，必須經消毒後，才能在水下衝洗，嚴禁汙染下水道。
16、無（wú）菌室應每月檢查菌落數（shù）。在超淨工作台開（kāi）啟（qǐ）的（de）狀態下（xià），取內徑90mm的（de）無菌培養皿若幹，無菌操作分別注入融化並冷卻至（zhì）約45℃的營養（yǎng）瓊脂培養基約15ml，放至凝固後，倒置於30～35℃培養箱培養48小（xiǎo）時，證明無菌後，取平板3～5個，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30分鍾後，倒置於30～35℃培養箱培養48小時，取出檢查。100級潔淨區平板（bǎn）雜菌數平均不得超過（guò）1個（gè）菌落（luò），10000級潔淨室平均不得超過（guò）3個菌落。如超（chāo）過限度，應對無菌室進行*消毒，直（zhí）至（zhì）重複檢查合（hé）乎要求為止。
六、參照 《藥品衛生檢驗方法》 《中國藥品檢驗標準操作規範》中 (無菌檢查法)章節 中（zhōng）華人民共和國醫藥行業標（biāo）準 YY/T0188.6-1995《藥品檢驗操作規程》
七、適用部門
質（zhì）量管理部
八、無菌（jun1）室（shì）技術指導說（shuō）明
在獲得了無菌（jun1）環境和無菌材料後，我們還要保持無（wú）菌狀態，才能（néng）對某種（zhǒng）特定的已知微生（shēng）物進行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很（hěn）容易混（hún）入。外界不相幹的微生物混入的現象，在微生（shēng）物學中我們叫做汙染雜菌（jun1）。防止汙染是（shì）微生物（wù）學工作（zuò）中十分關（guān）鍵的（de）技術。一方麵是（shì）*滅菌，另一方麵防止汙染，是無菌（jun1）技術（shù）的兩個方麵。另外，我們還要防止（zhǐ）所（suǒ）研（yán）究的微生物，特別是致病微生物（wù）或經（jīng）過（guò）基因工程改造了的本來（lái）自（zì）然（rán）界不存在的微生物從我們的實（shí）驗（yàn）容器中逃（táo）逸到外界環境中去。為了這（zhè）些目的，在微生物學中，有許多措施。
無菌室（shì）一般是在（zài）微生（shēng）物實（shí）驗室內專辟（pì）一個小房（fáng）間。選（xuǎn）用彩鋼板（bǎn）及鋼化玻璃建造。麵積不宜過大，約5-20平方米即可，高2.5米左右。無菌室外要設（shè）一個緩衝間（jiān），緩（huǎn）衝間的門和無菌室的門不（bú）要朝向同一方向，以免氣流帶進雜（zá）菌。無（wú）菌室和緩衝間都必須密閉。室內裝備的換氣設備必（bì）須有空（kōng）氣過濾裝置。無菌室內的（de）地麵、牆壁必須平整，不易藏汙納垢，便（biàn）於清洗。工作台的台麵應該處於水平狀態。無菌室和緩衝間都裝有紫外線燈，無（wú）菌室的紫外線燈距離工作台麵1米。工作人員進入無菌室應穿滅過菌的服裝，戴帽子。
當前無（wú）菌（jun1）室多（duō）存在於微生物工廠，一般實驗（yàn）室則使用（yòng）超淨台。超淨台其主要功能是利用（yòng）空氣層流裝置排除工作台麵上部包括微生物在內的各種微小塵埃。通過電動（dòng）裝（zhuāng）置使空氣通（tōng）過過濾器具後進入工作台麵，使台麵始終保持在流動無菌空氣控製之下。而且在接近（jìn）外部的（de）一方有一道高速流動的氣（qì）簾（lián）防止外部帶菌空氣進入（rù）。