
無菌室也稱接種室,是係統接種、純化菌種等無菌操作的實驗室。在微生物工作中,菌種的接種移植是一項主要操作,這項操作(zuò)的特點就是要(yào)保證菌種純種,防止雜菌的汙染。在(zài)一般環境的空氣中,由於存(cún)在許多塵埃和雜菌,很易(yì)造成汙染,對接種工作幹擾很(hěn)大。
無菌室的設置應根據既經濟又科學的原則來設置。其基本要求有以(yǐ)下幾點:
(1)無菌(jun1)室應有內、外兩(liǎng)間,內間是無菌室,外間是(shì)緩衝室。房間容積不宜過大,以(yǐ)便於空氣滅菌。內間麵積2×2.5=5m2,外(wài)間麵積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應有天(tiān)花板。
(2)內間應當設拉(lā)門,以減少空氣的波動,門應設在離工作台zui遠的位置上(shàng);外間的門(mén)也用(yòng)拉門,要設在距內間zui遠的位置上。
(3)在分隔內間與外間的牆壁或“隔扇”上,應開一個小窗,作接種過程中必(bì)要的內外傳遞物品(pǐn)的通(tōng)道,以減少(shǎo)人員進出內間的次數,降低汙染程(chéng)度(dù)。小窗寬60cm、高(gāo)40cm、厚30cm,內外都掛對拉的窗扇。
(4)無菌室容積小而嚴(yán)密,使用(yòng)一段時間後(hòu),室內溫度很高,故應設(shè)置通氣窗。通氣窗應設在內室進門處的(de)頂棚上(即離(lí)工作台zui遠的位(wèi)置(zhì)),為雙層結構,外層為百葉窗,內層可用抽板(bǎn)式(shì)窗扇(shàn)。通氣窗可在內室使用後、滅菌前開啟,以流通(tōng)空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。
無菌室內設備和用具:
(1)無菌室內的工作台,不論是什麽(me)材(cái)質、用途(tú)的,都要求表麵光滑和台麵水平(píng)。
(2)在內室和外室(shì)各安(ān)裝一個紫(zǐ)外燈(dēng)(多(duō)為30W)。內室的紫外線燈應安(ān)裝在經常工作的座位正上方,離地麵2m,外室的(de)紫外線燈可安裝在外室中央。
(3)外室應有(yǒu)的工(gōng)作服、鞋、帽、口罩、盛有(yǒu)來(lái)蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶(róng)液等。
(4)內室應有酒精燈、常用接種工具、不鏽鋼製的刀、剪、鑷子、70%的(de)酒精棉球、工業酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛(qiān)筆、標簽紙、膠水、廢物筐(kuāng)等。
無菌室的滅菌消毒:
(1)薰蒸:這是(shì)無菌室*滅菌的措施。無菌室使用了較長時間,汙染比較嚴重時,應進行薰蒸(zhēng)滅菌。可用甲醛、乳酸或(huò)硫磺(huáng)薰蒸。
(2)噴霧:在每(měi)次(cì)使用無菌室前進行。噴霧可(kě)促使空氣中微粒及(jí)微生物沉降,防止桌麵、地麵上的微塵飛場,並有殺菌(jun1)作(zuò)用(yòng)。可用5%石炭酸噴霧。
(3)紫外線照射:在每次使用無(wú)菌室前進行(háng)。紫外線有較(jiào)好的殺(shā)菌效果。通常應開啟紫(zǐ)外線燈照射30~60min。
無菌室工作規程:
(1)無菌(jun1)室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈(dēng)照射30min以上,或在使用(yòng)前30min,對內外室用5%石炭酸噴霧。
(2)用肥皂洗手後,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工(gōng)作服、工(gōng)作帽和工作(zuò)鞋,戴好口(kǒu)罩,然後用2%煤酚皂液將手浸洗2分鍾。
(3)將各種需用物品搬進內室清點、就位,用5%石炭酸在工作台麵上方和操作員站位空(kōng)間噴霧,返回外室,5~10min後再進內(nèi)室工作。
(4)接種操(cāo)作前,用70%酒精棉球擦手;進行無菌操作時,動作要輕緩,盡量減少空氣波動和地麵揚塵。
(5)工作中應注意安全。如遇棉塞著火(huǒ),用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用(yòng)嘴(zuǐ)吹,以免擴大燃(rán)燒;如遇有菌培(péi)養物灑落或打碎有菌容器時,應用(yòng)浸潤5%石炭酸的抹布包裹(guǒ)後,並用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭台麵或地麵,用酒精棉球擦手後再繼續操作。
(6)工作結束,立即(jí)將台(tái)麵收拾幹淨,將不應(yīng)在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室後,對無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧,或(huò)開紫外線燈(dēng)照(zhào)射30min。