陽性菌實驗室的探討

陽性菌實驗室（以下簡（jiǎn）稱陽性菌室）是微生物實驗室的重要組成部分，是保證微生物檢驗工作順利進行的重要載（zǎi）體。隨著職能（néng）調整和技術規範的不斷*，對陽性菌室的要求和管理（lǐ）也日趨*。
一、陽性菌室的功能
陽性菌室是與活（huó）菌操作有關的實驗（yàn）區域。實現的主要功（gōng）能包括：
（1） 菌株的分離、純化、接（jiē）種（zhǒng）和傳代；
（2） 工作菌液的製備；
（3） 增菌（jun1）培養物或陽性汙染物中致病微生物的分離（lí）和提純；
（4） 陽性（xìng）對照實驗操作及陽性培養；
（5） 已知、未知或疑似微生物的鑒定和確認。
為防止可能的微生物交叉汙染，應設立獨立的（de）細菌（jun1）室和（hé）真菌室，嚴禁在陽性菌室從事無菌取樣、無菌備品的準（zhǔn）備、供試品溶液的製備、樣本貯藏等實驗活動。
二、相關（guān）技術規範
（1）《藥品微生物實驗室規範指導原（yuán）則》（中國藥（yào）典 附錄ⅪⅩ Q）
（2）《生物安全實（shí）驗（yàn）室建築（zhù）技術規範》GB 50346
（3）《實驗室生物安全通用要（yào）求》GB 19489
（4）《人間傳染的病原微生物名錄》衛科教發[2006]15號
（5）《食品安全微生物（wù）學檢驗 總則》GB 4789.1等（děng）。
依據以上技術規範要求，藥品檢測實驗室（包（bāo）括（kuò）食品、保健食（shí）品、化妝品）使用的質（zhì）控菌及檢測出的致病菌，如沙門菌、銅綠假單（dān）孢菌（jun1）、金黃色葡萄球菌、腸杆菌等，均屬於危（wēi）害程度第三類，大量活菌操作及陽性樣本分離純化等操作應在二級生物安全實驗室內進行，因此（cǐ）陽（yáng）性菌室應滿足國家標準GB 19489中二級生物安全實驗室的相（xiàng）關（guān）要（yào）求。
三、硬件要（yào）求
微生物實驗室須按微生物檢驗（yàn）工作（zuò）流程（chéng）合理（lǐ）布局潔（jié）淨區、活菌區（生物安（ān）全區）以及輔助準備區，保證檢驗（yàn）過程運行（háng）順暢，無交叉，無混淆。陽性菌室須按照生物二級實驗（yàn）室建築技術規範設計，配備生物安全櫃保證（zhèng）保護環境和操作人員（yuán）安全，配備洗眼器或應急噴淋裝置保證應（yīng）急事故發生時對操（cāo）作人（rén）員的緊急救助。
四、軟件（jiàn）管理
除上述硬件要（yào）求（qiú）外，為防止交叉汙染，確保檢測結果準確，陽性菌室應建立嚴格的管理製度。主（zhǔ）要包（bāo）括：
（1）《陽性菌室生物安全管理製（zhì）度》，對陽性菌室出入、生物 安全（quán）櫃使用（yòng）、人員防護、活菌操作、廢棄物處理、風險評估等作出規定，此外還（hái）要明確意外事故的（de）應急處置程序。
（2）《陽性菌室清潔消毒規程》，規定清潔周期、消毒方式和頻次、消毒劑的種類、效果（guǒ）評價等。
（3）《生物（wù）安全櫃使用及維護規程》，規定生物安全櫃使用、維護規程、性能確認（rèn）的程序。
（4）《實驗用菌株的管理製度》，規定實驗菌種購買、複蘇（sū）、活化、傳代、使用、保藏、銷毀（huǐ）及記錄等（děng）。
綜（zōng）上，陽性菌室（二（èr）級生物安（ān）全實驗室）應嚴格按國家相關（guān）規定進行設立、使用及（jí）管（guǎn）理，確保人（rén）員、環境、樣品安全及檢測結果準確可靠。
附加內容：
陰性對照實驗區（qū）、陽性對照實驗（yàn）區共用人（rén）流物流通道未能有效嚴格區分，易出現交叉汙染。且在《藥品檢驗所實驗室質量管理規範》(試（shì）行)在第十八條：無菌檢查室與陽性對照室應嚴格分開。
在GMP檢查中（zhōng）的2802條項中明（míng）確規定：無菌檢查室不得與陽（yáng）性對照（zhào）室使用同一實驗室。條（tiáo）項解釋中提到“無菌室和陽性對照室不可公（gōng）用更衣室及緩衝間，防（fáng）止汙染無菌室”。
再結（jié）合《醫藥工（gōng）業潔淨廠（chǎng）房（fáng）設計規範》（GB50457-2008）5.1.13條第2款：各類實驗室的設置，應符合（hé）下列要求：
1）陽性對照、無菌檢查、微生物限（xiàn）度檢查和抗生素微生物檢定等實驗室，以及放（fàng）射性同位素（sù）檢（jiǎn）定室等應分開設（shè）置。
2）無菌檢查室、微生物限度檢查室（shì）應為無菌潔淨室，其空氣潔淨（jìng）度等級不應低（dī）於10000級（jí），並應設置相應的人（rén）員淨（jìng）化和（hé）物料淨化設施。
《藥（yào）品（pǐn）微生物學檢驗技術》一書（shū）中提（tí）到（dào）：現代微生物（wù）學實驗室應基本滿足下列要求：
（1）具（jù）有開展無菌檢查（chá）、微生物限度檢查、無菌采樣等（děng）嚴格分開的、環境潔淨（jìng）度均為10000級、局部100級潔淨室。
（2）抗生（shēng）素微生檢定、抗菌（jun1）作用測定等實驗應各自有（yǒu）分開的半無菌實驗室（shì）。並與無菌檢查、微（wēi）生物限度檢查的實驗室（shì）嚴（yán）格分開（kāi），注意防止抗生素汙染引起的實驗結果假陰性。
（3）單獨分（fèn）開（kāi）的細菌培養室、黴菌培養室。