藥廠微生物實驗室的設計與管理

一、相關法規要求（qiú）
中國藥典2010年版《藥品微生物實（shí）驗室規範指導原則》中規定微生物實驗室應有符合無（wú）菌檢查法(附錄XⅢB)和微生物限度檢查法(附錄x IIIC)要求的（de）、用於具有開展（zhǎn）無菌檢查、微生（shēng）物限度檢（jiǎn）查（chá）、無菌采樣等檢（jiǎn）測活動的、獨立設置的潔淨室(區)或隔離係統，且須配備實驗準備區（qū）、樣品接收和貯存（cún）區、培養室（shì）、汙染物處理等區域並顯示標識。GMP(2010年修訂（dìng）版（bǎn）)第六十四條（tiáo）規定，實驗室的（de）設（shè）計應當確保其適用於預定的用途，並能（néng）夠避免混淆和交叉汙染（rǎn）。
二（èr）、微生物實驗室設（shè）計布局（jú）現狀及風險
陽性對照（zhào）室用於菌種的處理，因（yīn）其汙染（rǎn）嚴重藥廠都已單（dān）設更衣室和緩衝間分室進行，而無（wú）菌檢查、微生物限度檢查與（yǔ）抗（kàng）生素微（wēi）生物檢定的實驗室未嚴格分開(公用更衣室及緩（huǎn）衝間)。在GMP檢（jiǎn）查中的2802條項中明確規（guī）定：生物檢定、微生物（wù）限度檢定和放射性同位素（sù）檢定等應分室進（jìn）行，條項解釋中（zhōng）提到“無菌室（shì）和微生物限度室不可公用更衣室及緩衝間，防止汙染無菌室"。公用更衣室及緩衝（chōng）間勢必會汙染無菌室，微生物限度室的樣品是含菌的，汙染無菌室（shì）後產品可能出現假（jiǎ）陽性的結果，抗生素具（jù）有抑菌（jun1）性，汙染（rǎn）無菌室後產品可（kě）能出現假陰性的結果，這樣根（gēn）本無法保證無菌檢查結果的真實性，也無法就出現的超標結果（guǒ）進行（háng）調查，無菌檢查也就失（shī）去了意義。
無菌檢查室、微生物限度室、抗生素微生物檢定、陽性對照實驗室因送回風係統（tǒng）設置不合理（lǐ）無（wú）法調整壓差，有的藥廠不同實驗室的回風共用一道“夾牆"，會造成實驗室之間（jiān）的交叉汙染。對於要求無（wú）菌的環境(如無菌檢查室、微生物限度檢查室)應該保持相對正壓，防止有菌區（qū）空氣進入發生汙染。對於汙染源(如陽性（xìng）對照室、抗生素微生物檢定室（shì）)應該保持相對負壓（yā），防止汙染物質的擴散對實驗結果和（hé）人員（yuán）安（ān）全造成影響。
微生物檢驗室通常（cháng）離（lí）生產區較遠，且可能設置在樓層（céng）上，有的藥廠在微生物檢驗室的（de）潔淨區內用飲用水作為清潔用水，用於人員的洗手（shǒu）和房（fáng）間的清潔，飲用水中含有大量的細菌和不溶性微粒，會（huì）對無菌環境造成破壞。有的藥廠微生物檢驗室采用明管排水。
微生物檢驗室潔淨區的內（nèi）表（biǎo）麵不平整，如照明燈、壓差計未采用嵌入式安裝，不易進行清（qīng）潔和El常擦拭消毒。有菌區和無菌（jun1）區的潔具混用，帶來交叉汙染。無菌區的清潔用具沒有經過滅菌處理，消（xiāo）毒液沒有經過除菌過濾，無菌區的環境從而遭到破壞，影響（xiǎng）實（shí）驗結果。
三、微生物實驗室設計（jì）要求
微生物（wù）實驗室（shì）的布局、設（shè）計和建造應有利於避免交叉汙染、便於清潔及日常維護，以保證高潔淨度的無菌實驗環境（jìng）；其次，人和物是潔淨區的主要汙染源。因此，必須對係統的（de）操作人員進行培訓，讓其充分掌握係統的運行要求，使實驗用品（pǐn）、人帶來的汙（wū）染得到有效控製。在（zài）人、物流的設計（jì）和管理上，基本原則是不（bú）經過（guò）淨化處理的人、不經消毒（dú）滅菌的物品（pǐn）不能進（jìn）入（rù）無菌區域。
1、人員流（liú）動
根據GM2010版修訂版 要（yào）求，人、物流分開。4個實驗室擁有獨立的（de）更衣係統，避免（miǎn）交叉汙染。物品集中通過潔（jié）淨互鎖傳遞窗傳（chuán）遞，對於大容量注（zhù）射劑（jì）檢品（pǐn）量大的問題，防止頻繁開啟傳遞窗造成無菌檢查室環境的破（pò）壞，物料經外清緩衝間（jiān）傳入無菌檢（jiǎn）查室。所有（yǒu）的樣品經（jīng）75％酒精在樣品準備室擦拭後傳入相應實驗室，其他器具均需滅菌後（hòu）傳入。
美國藥典規定，用於（yú）進行無菌檢驗的設施（shī）與用於製藥（yào）的設施應該（gāi）是一致的，並規定，用於無菌檢驗的設施（shī）不應比無菌加工生產設施造成更多的微生物汙染幾率。因此，合理的設計應該包括更衣區域和通過氣閘（zhá）。環境的監測和著裝應（yīng）該與藥品（pǐn）生（shēng）產中相（xiàng）一致。根據風險（xiǎn）管理的原則，對於要求相對無菌環境的無菌檢查室（shì）(B+A)和微生物限度檢查室(c+A)基本采用嵌（qiàn）套式設計（jì）。
無菌檢查室和微生物限度（dù）室要求（qiú）檢測（cè）環（huán）境無菌的，需把操（cāo）作人員所用潔淨服進行包裹以防止汙染，無菌檢（jiǎn）查室和（hé）微生物限度室內操作人員不能超過2名。無菌服經清洗後裝入呼吸袋內在雙（shuāng）扉脈動真空滅菌櫃進行滅菌，在進入無菌區時裝有無菌服的呼吸袋帶入。需（xū）製定SOP對更衣過程中的每一個細節進行規範，更衣的程序為（wéi）：脫衣-洗手消毒-帶手套脫鞋-穿無菌鞋-穿無菌內服-脫手套-帶手（shǒu）套-穿無菌外服-帶無（wú）菌手套（tào）。此外，陽性對（duì）照室的潔淨級別可設（shè）計為C+A，效價測定室的潔淨級別可設計為D級。
2、物流
進入的物流與（yǔ）人流應嚴格分開，每個實驗（yàn）室都有單獨的傳遞窗傳遞樣品和實驗用具，所有樣品必須用75％的酒（jiǔ）精在（zài）樣（yàng）品（pǐn）擦（cā）拭（shì）區進行擦拭，用於無（wú）菌區的（de）實驗用具必須經（jīng）滅菌後才能傳入，滅菌的效果應當經過驗證，傳遞窗必須裝有紫外燈進（jìn）行消毒，需定期對其（qí）消毒（dú）效果進行評價以便及（jí）時更換紫外燈管。對於陽性（xìng）對照實驗室可能產生的嚴重汙染物宜（yí）通過（guò）專用的傳遞窗傳遞，並做滅活處理。各實驗（yàn）室的（de）潔具單獨存放，防止交叉汙染。
3、空調（diào）係統整個係統可采用1台潔淨空調，因無菌（jun1）檢查室和微生物限度室內的空氣質量較高（gāo）可經回風循環利（lì）用。為避免交叉汙染，抗生素微（wēi）生（shēng）物檢定室、陽性對照室不回風（fēng），采用全（quán）排，並采用“豎井"式回風，單閥單控，保證壓差。
無菌檢查室和穿無菌外衣（yī）兩個房間須達到B級要求，因其操作人員僅限於（yú）1人，發塵量較少，可（kě）參（cān）考ISPE(國際製藥工程協會)將換（huàn）氣次數設為（wéi）40~60次／h，C級區（qū）的換氣次數設為20~40次／h，確定層高後便可以確定（dìng）空調的額定風量（liàng），但必須考慮風量的損（sǔn）耗。空調係統必（bì）須全天24 h開啟， 以維持正壓防止汙染。因故停機必須驗證。
4、水係統
實驗室通常離純化水製水間較遠，宜購買小型純化水機用於無菌區人員洗手、衛生清潔、儀器清洗等（děng），純化水即製即用，並經除菌（jun1）過濾後使用（yòng）。飲（yǐn）用水含有：大量的細菌會對（duì）實驗（yàn）室的環境（jìng）造成破壞。水（shuǐ）的輸送（sòng）管線要有一定的坡度，采用步步低的方式，管道殘留（liú）在設置的zui低點進（jìn）行排放。應設夾層放置排水管線。
5、潔淨裝修
整（zhěng）個實驗室的潔淨（jìng）裝修施（shī）工必須（xū）符（fú）合（hé）GB 50591—2010《潔淨室施工及（jí）驗收規範（fàn）》的要求。
四、微（wēi）生物實驗室管理
按照中國藥典2010版《藥品微生物（wù）實驗室規範指導原則》要求，微生物實驗人員應具備微生物學的教育背景，應經培訓並授權方可（kě）上（shàng）崗。在微（wēi）生物實驗室的入（rù）口應設置門禁裝置，隻允許微生物實驗人員（yuán）進入。還應定期對其進行（háng）無菌操作後（hòu）的無菌服表麵進行監測，防止人為差（chà）錯。
1、環境監測
應定期對微生物實驗室的環境進行監測， 以確保環境處（chù）於受控狀態，包括沉降菌（jun1）、浮遊菌、塵埃粒子（zǐ）、設備表麵監測、高（gāo）效過濾器檢漏，請參照相應（yīng）的國家（jiā）標準，設定適宜的監測頻率進行環（huán）境監測。
2、清潔消毒
微生物（wù）實驗室中無菌區域應盡量減少“陰（yīn）陽角"，便於無菌室日常的擦拭消毒，無菌區所用的潔具應經滅菌處理，所用的水（shuǐ）消毒劑應經（jīng）除菌過濾。有菌區和無菌區的潔具不能共用，應在潔具顏（yán）色上加以區分。