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三(sān)級生(shēng)物安全實驗室要求規範(fàn)

更新時間:2017-09-08  |  點擊率:4272

按照BSL-3標(biāo)準建造的實驗(yàn)室,也稱為生物安全(quán)實(shí)驗室。實驗室需與建築物中的一般區域隔離。其具體標準微生物操作、特殊操作、安全設備、實驗室設施要求如下。
1、
標(biāo)準操(cāo)作(zuò)
完成傳染性材料操作後,對手套進行消毒衝洗,離開實驗室之前,脫(tuō)掉手套並洗手。設施內禁止吃、喝、抽煙,不準觸摸隱形眼鏡和使用化妝品。戴隱形眼鏡的人也要佩戴防(fáng)護鏡或麵罩。食物隻能存放在工(gōng)作區以外的地方。禁止用(yòng)嘴吸取試驗液體,要使用的移液管(guǎn)。一切操作均要小(xiǎo)心,以減少和避免產生氣溶(róng)膠。實驗室衛生至少每(měi)天清潔一次,工作後隨時消毒工作台麵,傳染性(xìng)材料外溢(yì)、濺出汙染時要立即消毒處理。所有培養物、儲(chǔ)存物和其它日常廢(fèi)棄物在處理之(zhī)前都要(yào)用高(gāo)壓滅菌器(qì)進行有效地滅菌(jun1)處理。需要(yào)在實驗室外麵處理(lǐ)的材料(liào),要裝入牢固不漏的容器內,加蓋(gài)密封後傳出實驗室(shì)。實驗室的廢棄物在送到處理地點之前應消毒、包裝,避免汙染環境。對BSL-3內操作的(de)菌、毒種必須由兩人保管,保存在安全可靠的設施內,使用(yòng)前應辦理批準手續,說明使用劑量(liàng),並詳細登記,兩人同時到場方能取出。試驗要有詳細使(shǐ)用和銷毀記錄。昆蟲和齧齒類動物控製應參照其它有關規定執行。
2、
特殊操作
(1)製定安全細(xì)則
實(shí)驗室負(fù)責人要(yào)根據實際情況製定本實驗室特殊而全麵的生物安全規則和具體的操作(zuò)規(guī)程,以補充和細化本(běn)規範的操(cāo)作要求,並報請生物安全委員會批準(zhǔn)。工作人員(yuán)必須了解細則,認(rèn)真貫(guàn)徹執行。
(2)生物危(wēi)害標誌(zhì)
要在實驗(yàn)室入口的門上標記通用生物危害標誌。實驗室門口標記實驗微生物種類、實驗室(shì)負責人的名單和,指明進入本實驗室的特殊要求,諸如需要免疫接種、佩戴(dài)防護麵具或其它個人防護(hù)器具等。實(shí)驗室使用期間,謝*關人員參(cān)觀。如參觀必須經過批準並在(zài)個體條件和防護達到要求時方能進入(rù)。
(3)生物危害警告
實驗過程中實驗室或(huò)物理防護設備裏放有傳染性材料或感染動物時,實(shí)驗室的門必須保持緊閉,無關人員一律(lǜ)不得進入。門口要示以危害警告標誌,如掛紅牌或文字說明實驗的狀(zhuàng)態,禁止進入或靠近。
(4)進入實驗室的條件
實驗(yàn)室負責(zé)人要、控製或禁止進(jìn)入實驗室的實驗人員和輔助人(rén)員。未成年人不(bú)允許進入實驗室。受感染概率(lǜ)增加或感染後果(guǒ)嚴重的實驗(yàn)室工(gōng)作人員不允許進入實驗室(shì)。隻有了解實驗室潛在的生物危害和特殊要求並能遵守有關規定合(hé)乎(hū)條件的人才能進入(rù)實驗(yàn)室。與工作無關(guān)的動植物和其它物品不(bú)允許帶入實驗室(shì)。
(5)工作人員的培訓
對實驗室工作人員和輔(fǔ)助(zhù)人員要進行與工作有關(guān)的(de)定期和不定期的生物安全防(fáng)護專業培訓。實驗人員需經專門生(shēng)物專業訓(xùn)練和生物安全訓練,並由有經驗的(de)專家指(zhǐ)導,或在生物安全委員會指導監督下工作。必(bì)須學會氣溶膠暴露(lù)危害的評價和預防(fáng)方法。在BSL-3實驗室做傳染性工作之前,實驗室負責人要保證和證明,所有工作人員熟練掌握了微生物標準操作和特殊操作,熟(shú)練掌握本實驗室設備、設(shè)施的特殊操作運轉技術。包括操作致病因子和細胞培(péi)養的技能,或實驗室負責人特殊培訓的內容,或包括在安全(quán)微生物工作方麵(miàn)具有(yǒu)豐富經驗(yàn)的專家和安全委(wěi)員會指導下規定的(de)內(nèi)容。避免氣溶膠暴露:一切傳染性材料(liào)的操作不可直接暴露於空氣之中(zhōng),不能在開放的台麵上(shàng)和開放的容器內進行,都應在生物安全櫃內或其它物理防護設備(bèi)內進行。需(xū)要保護人體和樣品的操作可在室內排放式2A型生物安全櫃內進行。隻保護人體不(bú)保護樣品的操作(zuò)可在Ⅰ級生物安全櫃內進行。如果操(cāo)作帶有放射性或化學性有害(hài)物(wù)時應在(zài)2B2型生(shēng)物(wù)安全櫃。禁止使用超淨工作台。
(6)避免利器的感染
對可(kě)能汙染的利器,包括針頭(tóu)、注射器、刀片、玻璃片、吸管、毛細吸管和解剖刀等,必須經(jīng)常地采取高度有效的防範措施,必須預防經皮膚(fū)的實驗室感染。在BSL-3實驗室工作,盡量不使用針頭(tóu)、注射(shè)器和其它銳利的器件。隻有在必要時,如實質器官的注射、靜脈切開、或從動物體內和(hé)瓶子(密封膠蓋)裏吸取液體時才能使用,盡量用塑料製品代替玻璃製品。在注射和抽取傳染性材料時,使用一次性注射器(針頭與注射(shè)器一體的)。使用過的針頭(tóu)在消毒之前避免不必要的操作,如(rú)不可(kě)折彎、折斷、破損,不要用手直接蓋上原來的針頭帽;要小心地把其放在固定(dìng)方便且(qiě)不會刺破的處理利器的容器裏(lǐ),然後進行高壓消毒滅菌。破損的玻璃不能用(yòng)手直接(jiē)操作,必須用機械的方法清除(chú),如刷(shuā)子、夾子和鑷子等。
(7)汙染的清除和消毒
傳染性材(cái)料操作完成之後,實驗(yàn)室設(shè)備和工作台麵應用有效的消毒劑進行常規(guī)消毒,特(tè)別是傳染材料溢出、濺出其它汙染,更要及時消毒。濺出的傳染性材(cái)料的消毒(dú)由適合的專(zhuān)業(yè)人員(yuán)處理和清除,或由其它(tā)經過訓練和有使用高濃度傳染物工作經驗(yàn)的人(rén)處理。一切廢棄物(wù)處理之前都(dōu)要高壓滅菌,一切(qiē)潛在的實驗室汙物(如,手套、工作服等)均需在處理或丟棄之前消毒。需要修理、維護的儀器,在包裝運輸之前要進行(háng)消毒。
(8)感染性樣品(pǐn)的儲藏運輸
一切感染性樣(yàng)品如培養物、組織材料和體(tǐ)液樣品等在儲藏、搬動、運輸過程中都(dōu)要放在不(bú)泄漏的容器(qì)內,容器外表麵要*消毒,包裝要有明顯、牢固的標記。
(9)病原體痕跡的監測
采集所有實驗室工作(zuò)人(rén)員和其他有關人員的本底血清樣品,進行病原體痕跡跟蹤檢測。依據被操作病原體和設施功能情況或實際中發(fā)生的事件,定期、不定期采集血清樣本,進行特異性檢(jiǎn)測。
(10)醫療監督與保健
BSL-3實(shí)驗室工作(zuò)期間對工作者進行醫療(liáo)監督和保健,對於實驗室操作的(de)病原體,工作人員要接受相(xiàng)應的試(shì)驗或免疫接種(如狂(kuáng)犬病疫苗,TB皮膚試(shì)驗(yàn))。
(11)暴露事故的處理
當生物安全櫃(guì)或實驗室出現持續正壓時(shí),室內(nèi)人員應立即停止操作並戴上防護麵具(jù),采取措施恢(huī)複負(fù)壓。如(rú)不能及時恢複和保持(chí)負壓(yā),應停(tíng)止實驗(yàn),及早按規程退出。發生此類事故或具有傳染性暴露潛在(zài)危險的其它事故(gù)和汙(wū)染,當事者(zhě)除了采取緊急措施外(wài),應立即向實驗室負(fù)責人報告,聽候指示(shì),同時報(bào)告國家獸醫實驗(yàn)室生物安全管理(lǐ)委員會。負(fù)責人和當事人應對其事故(gù)進行緊(jǐn)急科學、合理的處理。事後,當事人(rén)和負責人應提供切合實際(jì)的醫學危(wēi)害評價,進行醫療(liáo)監督和預防治療。實驗室負(fù)責(zé)人對事件的(de)過程要予以調查和公布,寫出書麵報告呈報國(guó)家獸醫實驗室生物安全管理委員會(huì)同時抄報實驗室(shì)安全委員會並保留備份。
3、
安(ān)全設備(初級防(fáng)護(hù)屏障)
(1)防護服裝
實驗室內,工作(zuò)人員要穿(chuān)防護性實驗服,如長服裝、短套裝,或有護胸的工作服裝。消毒後清(qīng)洗,如有明顯的汙染應及時換掉,作為汙棄物(wù)處理。在實驗室(shì)外麵不能穿工作服。
(2)防(fáng)護手套
在操作傳染性材料、感染動(dòng)物和汙染(rǎn)的儀器時必須戴手套,戴(dài)雙層為好,必要時再戴上不易損壞的防護手套。更換手套前,戴在手上消(xiāo)毒衝洗,一次性手套不得重複使用。
(3)生物安(ān)全櫃
感染(rǎn)性材料的操作,如感染動物的解剖,組織培養、雞胚接種、動物體液的收取等,都應在Ⅱ級以上生(shēng)物安全櫃內進(jìn)行。離心、粉碎、攪拌等不能在Ⅱ級生物安全櫃內進行的工作可在較(jiào)大或特製的Ⅰ級生物安全(quán)櫃內(nèi)進行。
(4)其它物理防護
當操作不能在生物安全(quán)櫃內(nèi)進行時(shí),個人防護(Ⅲ級(jí)以上類似防護設備的具體要求)和其它物理防護設備(離心機安(ān)全帽,或密封離(lí)心機轉頭)並用。
(5)麵部(bù)保護
汙染區、半汙染(rǎn)區應備有防護麵具以便緊(jǐn)急使(shǐ)用,當房(fáng)間(jiān)內有感(gǎn)染動物時要戴麵具保護。建立緊急防護工作點。
(6)緊急(jí)防護用品
汙染區或半汙染區備用防護麵具、衝洗眼睛的器具和藥品等,隨時可用。
4、
實驗室設施(次級防護屏障)
BSL-3生物安(ān)全實驗室裏所有病原微生物的操作均在Ⅱ級以上(含Ⅱ級)生物(wù)安全櫃內進行,其次級屏障標(biāo)準如下:
(1)建(jiàn)築(zhù)結構(gòu)和平麵布局
建築物抗(kàng)震能力七級以上,防鼠、防蟲、防盜。實驗室內淨(jìng)高應在2.6米以上,管道層淨高宜(yí)不低於(yú)2.0米。建築物內實驗室應與活動(dòng)不受限製(zhì)的公共(gòng)區域隔開,設置安全門並安裝門鎖,禁止無關人員進入。進入設施的通道設帶閉(bì)門器的(de)雙扇門,其後是更(gèng)衣室,分成一更室(清(qīng)潔區)和二更室(半汙染區),二更室後麵為後室或稱(chēng)緩(huǎn)衝室(shì)(半汙染區),進出緩衝室的門應為自動互(hù)鎖。如果是多個實驗室共用一個公用的走廊(或緩衝室),則進入每個實驗室宜經過(guò)一個連(lián)鎖的氣閘(鎖)門。實驗室應有安全通道和緊急出口,並有明顯標識。半汙染區與清潔區之間必須設(shè)置傳遞窗。洗刷室、機房等附屬區域應是清潔區,但應盡量縮短與實驗室的(de)距離,方便工作。實驗室內可設密閉觀察(chá)窗。
(2)密閉性和內表麵
一切設施(shī)、設備(bèi)外表無毛刺、無銳利棱角,盡量減少水平表麵麵積,便於清潔和消毒。各種管道通過的孔(kǒng)洞必須密封。牆和頂棚的(de)表麵要光滑,不刺眼、不積塵、不(bú)受(shòu)化(huà)學物(wù)和常用消毒劑的腐(fǔ)蝕,無滲水(shuǐ)、不凝集蒸氣。地表麵應該是一體、防滑、耐磨、耐腐、不反光、不積塵、不漏水,如能按汙染(rǎn)區劃分給予顏色區別更好。工作台麵不能滲水,耐中(zhōng)等熱、有機溶劑、酸(suān)、堿和常用消毒劑(jì)的損害和腐蝕。實驗室必要的桌椅櫥櫃等用具事先設計,便於穩(wěn)妥安放(fàng)和使用,彼此留有一定空(kōng)間便於清潔衛生(shēng),表麵消毒方便、耐腐。
(3)消毒滅菌設施
必須安裝雙扉式高壓蒸汽滅菌器,安裝在半汙(wū)染區與洗刷室之間。滅菌器的兩(liǎng)個門應互為連鎖,滅菌器應滿足(zú)生(shēng)物安全二次滅(miè)菌要求(qiú)。汙染區、半(bàn)汙染區的房間或傳遞窗內可安裝紫外燈。室內應配(pèi)製人工或自動消毒器(qì)具(jù)(如消毒噴霧器、臭氧消毒器)並備有足夠的(de)消(xiāo)毒劑。一切實驗(yàn)室內的廢棄物都要分類集中裝在可靠的容器內,都要在設(shè)施(shī)內進行(háng)消毒處理(高壓、化學、焚化、其它處(chù)理),儀器的消毒選擇適當的方法,如傳遞式臭氧消毒櫃、環氧乙烷消(xiāo)毒袋等,如果廢棄物(wù)需要傳至實驗室外,應該(gāi)消毒後並裝入密封(fēng)容器、包(bāo)裝。
(4)淨化空調
實驗室汙(wū)染區和半汙染區采用負壓單向流全新風淨化空調係(xì)統。汙染區和半汙染區不允許安(ān)裝暖氣、分體空調,不可用電風扇。溫度230C±20C、相對濕度40%70%。室內噪聲不超(chāo)過60分貝(bèi)。氣流方(fāng)向始(shǐ)終保證由(yóu)清潔區流向汙染區(qū),由低汙染區(qū)流向高汙染(rǎn)區(qū)。空調係統(tǒng)應安裝壓力無關裝置,以保證係統壓力平衡,排風應采用一用一備(bèi)自(zì)動切換係統。發生緊(jǐn)急情況時(shí),應關閉(bì)送風係統,維持排風,保證實驗室內安全負壓。供氣需經HEPA過濾。排出的氣體必須經過至少兩級HEPA過濾排放(fàng),不允許在任何(hé)區(qū)域循(xún)環使用。
室(shì)內潔淨度高於萬級。實驗室送風口應(yīng)在一側的棚頂,出風口應在對麵(miàn)牆體的下部,盡量減少室內氣流死角(jiǎo)。保持單向氣流,矢流方式較為合適。實驗室門口安裝可視裝置,能夠確切(qiē)表明進入(rù)實驗室的氣流方向。Ⅱ級生物安全櫃每年檢(jiǎn)測一次。2A型的(de)排氣可進入室內,2B2型安全櫃和Ⅲ級安全櫃的排(pái)風要通過實驗室總排風係統排出。如果Ⅲ級安全櫃是帶有二次HEPA過濾、移動式,氣流亦可在室內排氣,但排氣口應靠近室內排風口。如有其它設備如液(yè)體消毒傳遞窗、藥物(wù)熏蒸(zhēng)消毒器等的抽(chōu)氣係統,必須經過HEPA過濾,並根據(jù)需要更換。
水的淨化處理每個房間出口附近設(shè)置一個非手動開關的(de)洗手池(chí)。汙染區、半汙染區(qū)和有可能(néng)被汙染的供水管道應采取防止回(huí)流措施。如有下水,水池或地漏要設(shè)置消毒設施。下水下方必須設有水封,並始(shǐ)終充+盈消毒劑,水(shuǐ)封(fēng)的排氣應加HEPA過濾裝置(zhì)。可(kě)能汙染的下水隻(zhī)能排放到消毒裝置內,消毒後再(zài)排至公共下水道。如沒有下水排放,或不外排的所有廢水均須收集並高壓(yā)處(chù)理。潔淨區域的下水可直接(jiē)排入公共下水道。
(5)汙染物和廢棄物處理
對可能汙染的物品和其它廢棄(qì)物要放在(zài)的防止汙染擴散或可(kě)消毒的容器裏,以便(biàn)消毒或高壓滅菌處理。
(6)實驗室監控係統(tǒng)
應對實驗室各種狀(zhuàng)態及設施全麵(miàn)設置監控報警點,構成*的實驗室安全報警係統。備用電源非雙路(lù)供電情況下,應配有備用電源,在停電時(shí),至少能夠保證(zhèng)空調係(xì)統、警鈴、燈光、進出控製和生物安全設備的工作。
(7)照明
照明應適合室內的一切活動,不反射、不刺(cì)眼,不(bú)影響視線。照明燈把燈具的部件裝在頂棚裏,或采(cǎi)取(qǔ)減少(shǎo)積塵措施。
(8)通訊
實驗室內外應有適合的通訊設施(shī)(、傳真、計算機等),進行無紙化操作。驗收和年檢BSL-3設施和運行必須是指令性的。實驗室的驗收或年檢應參考ISO10648標(biāo)準檢測方法(fǎ)進行密封性測試,其檢測壓力不低於250Pa,半小時(shí)的小(xiǎo)時泄漏率不(bú)超過10%,以保(bǎo)證維護結構(gòu)的可靠(kào)性。新建設施的功能必須檢(jiǎn)測驗收,確認設計和運作參數合乎要求方能使用。運行後每年再進行一次檢測確認。

 

 

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